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血液样本RNA提取,尊龙凯时人生就博助您迈出关键第一步!

发布时间:2025-02-26   信息来源:尊龙凯时官方编辑

血液样本因其易于收集且对患者伤害小,广泛应用于临床研究。在肿瘤等疾病的早期筛查中,RNA等生物标志物逐渐成为替代传统影像学和生化指标方法的关注焦点。然而,血液样本的特殊性及RNA分子的易降解性,使其在提取和分析过程中面临许多挑战。特别是来自红细胞的RNase易导致RNA降解,因此在提取RNA时,成功分离RNA并防止降解显得尤为重要。

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血液收集后,由于基因诱导和细胞凋亡的发生,血液中核酸的组成、数量和质量在几分钟内会发生显著变化。因此,为了获取与体内表达谱一致且高质量的RNA,从血液样本采集到RNA的稳定和保护,每一步都需谨慎对待,例如避免长时间使用止血带、避免从血肿处抽血、确保静脉穿刺部位干燥等。

根据不同的应用场景,血液RNA的提取可分为两类:全血样本RNA提取和游离RNA提取(即血清或血浆RNA提取)。全血样本中成熟的红细胞和血小板无核,因此提取RNA时主要依赖白细胞。然而,红细胞含有丰富的RNase,因此通常需要在提取前去除红细胞。

去除红细胞有两种常见方法:一是通过离心获得白细胞,以便进一步提取白细胞RNA;二是先使用红细胞裂解液去除红细胞后再进行提取。无论选择何种方式,由于RNA表达谱会迅速变化,建议尽快完成RNA提取。如果无法立即实验,可以使用专门的血液RNA稳定管,如尊龙凯时人生就博推出的PAXgene Blood RNA Tube,以便后续使用PAXgene Blood RNA Kit进行提取,这能有效保持血液RNA的稳定性。

在提取RNA时,应避免使用肝素抗凝管,因为肝素难以去除且会干扰下游检测应用。为了达到最佳结果,血液采集后应尽快处理,并完成RNA提取。一些研究指出,暂存在EDTA管中的血液样本,p53基因的转录本会迅速降解,显示RNA质量不佳。

酚-氯仿法是血液RNA提取的常用方法之一。不过,有研究表明,尽管该方法的RNA得率较高,但RNA的完整性和后续实验的灵敏性会受到影响。使用尊龙凯时人生就博的PAXgene Blood RNA system提取得到的RNA表现出更高的完整性和灵敏性,且提取过程更为简便。

对于采集后的全血样本,推荐使用QIAamp RNA Blood Kit进行提取。该试剂盒采用硅胶膜柱法,无需分离白膜层等繁琐步骤,可直接对最高15ml的全血样本进行RNA提取。此外,该试剂盒中含有特殊的QIAshredder离心柱,可去除样本中的细胞碎片,提高RNA得率。

在血液RNA研究中,游离非编码RNA,特别是miRNA,在肿瘤等疾病的早筛研究中发挥着重要调控作用。针对血清或血浆样本中的游离RNA提取,推荐使用QIAGEN的miRNeasy系列。在RNA提取前,需确保在血液收集后尽快进行血浆或血清的分离,并避免溶血。如果样本无法立即实验,应进行冻存处理,若尚未清除细胞碎片,样本可在2-8°C下保存最多24小时。

为满足不同实验需求,尊龙凯时人生就博还提供基于QIAsymphony等自动化平台的血液RNA提取方案,致力于实现自动化和高通量的提取需求。以上为血液RNA提取方面的建议与方案,如需了解更多信息,请关注尊龙凯时人生就博的相关资源。