保藏方法大揭秘

传代培养保藏法

传代培养保藏法是一种简便的短期保存技术，类似于将细菌置于“小旅馆”，并定期为其“换房间”。通过将菌种接种在固体斜面培养基上，存放于4℃的冰箱中进行保藏。不过，该方法的保藏时间较短，细菌容易发生变异，且容易受到污染。例如，普通细菌只能保存约1个月，而假单胞菌则需要每两周“换房间”一次。

液体石蜡覆盖保藏法

液体石蜡覆盖保藏法像给细菌穿上“雨衣”，可以隔绝空气，防止水分蒸发。将液体石蜡注入斜面培养物中，细菌便可在“雨衣”保护下安静“休眠”，保藏时间可延长至1-2年，某些霉菌、放线菌、芽孢细菌甚至能保持超过2年的活力。

载体保藏法

载体保藏法则是将细菌附着在土壤、沙子、硅胶或滤纸等“小沙发”上进行干燥保藏，适用于能够产生芽孢或孢子的微生物，保存时间可达2年。

冷冻保藏法

冷冻保藏法通过低温减缓细菌的新陈代谢，就像将它们送入“冰箱”。常见的保存方式包括-20℃、-80℃冰箱，以及液氮保存（-196℃）。甘油管冷冻保藏法则是将菌种悬浮在甘油保护剂中，保藏时间可达数年，适合大多数微生物。

冷冻干燥保藏法

冷冻干燥保藏法的过程是将细菌在极低温度下快速冷冻，然后在减压条件下除去水分，形成“真空包装”，能够有效延长保藏时间。

液氮超低温保藏法

这是保藏技术中最“豪华”的一种方式，将菌种悬浮于保护剂中并置于-196℃的液氮中，能实现超长时间的保藏，适合大多数微生物。

活化方法速速学

传代培养保藏法的活化

活化过程很简单，从斜面培养基上挑取少量菌体，接入新鲜的斜面培养基，通常经过2-3次传代，细菌便能恢复活力。

液体石蜡覆盖保藏法的活化

同样挑取少量菌体，转接到适合的培养基上，待生长繁殖后进行再转接，就能够使细菌“满血复活”。

载体保藏法的活化

从载体中取出细菌样本，转接至适宜的培养基。例如，从沙土中提取部分沙粒，接入合适的斜面培养基，长出菌落后再转接一次。

冷冻保藏法的活化

取出冻存管后立即放入38℃-40℃的水浴中快速复苏，并适当摇动，待内部冰块完全融化后，将内容物移至适宜的培养基进行培养。

冷冻干燥保藏法的活化

先用75%酒精擦拭安瓿上部，随后对其顶部加热，用冷水使其破裂。再利用无菌水或培养液溶解菌块，并转移至新鲜培养基中进行适温培养。

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